Yazar "Aykül, Fatmanur" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • Küçük Resim
    Öğe
    Lignoselülozik ksilooligosakkaritlerin kolon kanseri hücre hattı üzerinde moleküler etkilerinin belirlenmesi
    (Selçuk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, 2017-04) Aykül, Fatmanur; Kara, Meryem
    Fonksiyonel gıdalar beslenme üzerinde sağlık yararları sağlayan gıda veya gıda bileşenleridir. Ksilooligosakkaritler (XOS), fonksiyonel gıdalarda aktif bileşen olarak yer almaktadırlarlar. Ksilooligosakkaritlerin gıdalara eklenmesi kolon kanseri ve kardiyovasküler hastalıkları önleme, kalsiyum emiliminde artış, diş çürümelerinde azalma, bağırsak fonksiyonlarında iyileşme gibi olumlu pek çok fayda sağlayabilmektedir. Bu araştırmanın amacı doğal kaynaklardan biyoteknolojik yollarla elde edilen ksiloolgosakkaritlerin insan sağlıklı epitel kolon hücresine model hücre CoN ve kolon kanserine model hücre Caco-2 üzerinde sitotoksik ve moleküler düzeyde etkilerini araştırmaktır. Bu amaçla birinci aşamada kenevir kıymıklarından elde edilen ksilooligosakkaritlerden furfural ve hidroksimetil furfural (HMF)' nin uzaklaştırılması için nanofiltrasyon (NF), aktif karbon (AK) (Meck AC) adsorbsiyonu ve iyon değişim reçineleri (DOW-XUS 43578, Diaion CR11, Dowex-HCR W2, Purolite C160) kullanılmıştır. Ayrıca NF-AK ve NF-iyon değişim reçineleri hibrit sistemi de kullanılmıştır. Ksilooligosakkaritlerin antioksidan aktivitesini belirlemek için DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) metodu kullanılmıştır. DPPH ölçümleri 517 nm dalga boyunda ELISA okuyucu ile gerçekleştirilmiştir. İkinci aşamada ise gerçek zamanlı hücre analiz sistemi xCELLigence kullanılarak sitotoksisite analizleri yapılmıştır. Ayrıca XOS' ların moleküler etkilerinin incelenmesi için farklı miktarlarda XOS (10 mg/ml, 5 mg/ml, 1.25 mg/ml) ile muamele edilmiş sağlıklı ve kanserli kolon hücrelerinden RNA izole edilmiş ve XOS'ların RT-PCR (Geri transkriptaz-PZR) yöntemiyle oksidatif stres ile ilgili NFE2L2 geninin ifadesinde etkisi olup olmadığı araştırılmıştır. Nanofiltrasyon prosesinin HMF gidermede etkili olmadığı, ancak furfuralı neredeyse tamamen uzaklaştırdığı belirlenmiştir. HMF ve furfural uzaklaştırmada reçine ve aktif karbon uygulamalarının etkili olduğu tespit edilmiştir. Purolite C160 ve Dowex-HCRW2 reçinelerinin HMF ve furfural uzaklaştırmada etkili olmadığı, DOW XUS 43578, Diaion CR11 ve Merck aktif karbon ise verimli olduğu belirlenmiştir. Nanofiltrasyon ve aktif karbon proseslerinin birlikte düşünüldüğü hibrid sistem kullanımı ile HMF % 99.3 ve furfural % 100 oranında uzaklaştırılmıştır. Ksilooligosakkaritlerin DPPH süpürücü etkisi L-Askorbik asit ile karşılaştırılmıştır. XOS ve L-Askorbik asit için IC50 değerleri sırasıyla 122.29 μl/ml ve 12.01 µg/ml olarak ölçülmüştür. CoN ve Caco-2 hücre modelleri ile yapılan hücre kültürü çalışmalarında XOS' un 5 mg/ml' den daha az olan konsantrasyonları sitotoksisite ve dublikasyon süresi bakımından güvenli bulunmuşlardır. XOS'ların artan doz miktarına göre CoN/NFE2L2 ve Caco-2/NFE2L2 gen ekspresyon seviyelerinde anlamlı artış ve azalışlar bulunmamıştır.