Yazar "Bilgiç, Dilek Gün" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • Küçük Resim
    Öğe
    Adamts agrekazların kondrositlerdeki biyolojik rolleri ve klinik uygulama potansiyelleri
    (Selçuk Üniversitesi Tıp Fakültesi, 2015) Bilgiç, Dilek Gün; Çora, Tülin
    Osteoartrit, eklem kıkırdağının yük binen kısımlarında kıkırdakta hasarlanma, eklem çevresinde yeni kemik oluşumu ve sinovitis ile karakterize dejeneratif bir eklem hastalığıdır. Tutulan eklemde, ağrı ve deformiteye yol açmaktadır. OA tedavisinde, ağrı kesici ilaçlar ilk basamak tedavidir. Son evrede ise hastalar eklemlerini kaybederek, protez ameliyatı ile tedavi edilmektedir. OA nın sebebi henüz bilinmemektedir. Yaşlanma, obezite, travma gibi dış nedenler yanında genetik yatkınlık da suçlanmaktadır. Bugüne kadar yapılan çalışmalarda, kıkırdak yıkımına neden olan katabolik enzimlerle ilgili birçok veriye ulaşılmıştır. Bu enzimler, matriks metalloproteaz ailesi ve ADAMTS ailesi üyeleri olmakla birlikte, ADAMTS5 enzimi kıkırdağa daha spesifiktir. ADAMTS5 geninin kıkırdak dokusunda regülasyonu ile ilgili çalışmalar, OA patogenezini konu alan çalışmaların yeni odağı haline gelmiştir. Bugüne kadar yapılan çalışmalarda, inflamatuvar sitokinlerin, ADAMTS5 genini stimüle ederek kıkırdak hasarını artırdığı belirtilmiştir. Bu sitokinlerin başında, TNFα gelmektedir. TNFα nın hangi aracı moleküllerle, bu geni regüle ettiği araştırılmaktadır. TNFα nın, hedef moleküllerinden biri olan NFĸB, bu bağlamda araştırılmaktadır. Bu çalışmada, ADAMTS5 geninin, kondrositlerde, TNFα tarafından regülasyonu ve NFĸB nin bu regülasyondaki rolü araştırıldı. Kondrosit hücreleri ve kontrol hücrelerinde, TNFα uygulanarak, TNFα nın bilinen hedef molekülleri olan TNFα ve IĸB genleri ve ADAMST5 geni ekspresyonları, RNA düzeyinde real time PZR ve protein düzeyinde western blot tekniği ile araştırıldı. Daha sonra, TF bağlanma bölgesi tahmin programıyla, ADAMTS5 geni promoteri üzerinde NFĸB için bağlanma bölgeleri tespit edildi. Bu bölgeleri içeren ADAMTS5 geni promoter delesyon konstraktları oluşrurularak plazmid ekspresyon vektörlerine klonlandı. OUMS-27 ve HEK-293T hücrelerine transfekte edildi. TNFα tarafından uyarılan bu hücrelerde, ADAMTS5 geni promoteri aktivitesi, lusiferaz deneyleriyle araştırıldı. Deneyler sonucunda, OUMS-27 hücrelerinde, TNFα uygulanmasının ardından, ADAMTS5 geni, mRNA ve protein düzeyinde aktive oldu. Lusiferaz deney sonucunda da aktivatör NFĸB bölge sayısı en fazla olan ADAMTS5 geni promoter konstraktı en yüksek aktiviteyi gösterdi. TNFα uygulanması, bu konstraktın aktivitesini daha da artırdı. Bu sonuçlara göre, OUMS-27 hücrelerinde, TNFα , NFĸB aracılığıyla, ADAMTS5 genini stimüle etmektedir. Ancak, kontrol hücre grubu olan Hek-293T de ADAMTS5 geni ekspresyonu, TNFα dan etkilenmemektedir