Kültüre edilmiş fleksör tendon fibroblastlarına 5-flourourasil uygulamasının transforming growth faktör beta-1 gen ekspresyonu üzerine olan etkisi

Fleksör tendon onarımları sonrasında postoperatif dönemde görülen yapışıklıklar önemli bir problemdir. Yapışıklık oluşumunu azaltmak için çok farklı farnakolojik ajanlar denenmiştir fakat halen klinik olarak rutin kullanılan bir ilaç bulunmamaktadır. Son zamanlarda yapılan çalışmalarda tendon onarımı sonrasında, tek doz lokal 5- Flourourasil uygulamasının yapışıklığı azalttığı gösterilmiştir fakat etki mekanizması tam olarak bilinmemektedir. TGF-β1 ise tendon iyileşmesini düzenleyen ve yapışıklık oluşumunda etkili bir büyüme faktörüdür. 5-FU'in TGF-β1 gen ekspresyonu üzerine etkisini araştırmak amacıyla planlanan bu çalışmada köpekten elde edilen tendon fibroblastları kültüre edildi. Hazırlanan hücre kültürlerine 0 mgr/ml (kontrol) ve 5,15,25 mgr/ml dozlarında 5-FU bir dakika süre ile uygulandı. Tedaviden sonraki 3. ve 7. günlerde RNA izolasyonları yapılarak TGF-β1 gen ekspresyon düzeyleri reverse transkripsiyon ve polimeraz zincir reaksiyonu ile kuantifiye edildi. 3. ve 7. günlerde ölçülen TGF-β1 gen ekpsresyon düzeyleri değerlendirildiğinde, hem kontrol grubu hemde farklı dozlar arasında istatiksel olarak anlamlı fark bulunmadı (p>0.05). Ekpresyondaki 3. günden 7. güne kadar olan değişim yüzdeleri incelendiğinde ise, kontrol grubu ile diğer tüm dozlar arasında istatiksel olarak anlamlı fark bulundu (p<0.05). Bu fark en fazla % 89 + 12'lik bir azalma ile 25mgr/ml 5-FU uygulanan hücrelerde görüldü. 5-FU'in tendon hücrelerinden TGF-β1 expresyonunu azaltarak postoperatif tendon iyileşmesini olumlu yönde etkilediği düşünülmektedir.

Postoperative adhesion formation is a challenging problem after flexor tendon repair. Various pharmacologic agents have been used to reduce adhesion formation but none of them is used clinically. In recent studies, it has been shown that a single topical 5-FU application after flexor tendon repair reduces postoperative adhesions but the effects of 5-FU are not clearly known. TGF-β1 is a growth factor which regulates tendon healing and causes adhesion formation. In this study the tendon fibroblasts harvested from dog tendons were cultured to investigate the effect of 5-FU on the gen expression of TGF- β1. Cell cultures were treated with 0 mgr/ml (control) and 5,15,25 mgr/ml 5-FU for one minute. Total cellular RNA were extracted at the 3rd and the 7th day after the treatment and the expression levels of TGF-β1 were quantified with reverse transcription and polimerase chain reaction. There was not significant difference between control and other groups when the expression levels of TGF-β1 were compared at the posttreatment 3rd and the 7th day (p>0.05). When the percent of the variation from 3rd to 7th day was observed there was a significant difference between control and other groups (p<0.05). This difference was the most in 25 mgr/ml 5-FU group with % 89 + 12 reduction. It has been thought that 5-FU effects postoperative tendon healing by reducing the expression of TGF- β1.